1...2...3... Por Todos Mis Compañeros

¿Estamos listos para empezar a buscar? No hay de que preocuparse, no me refiero a jugar a las escondidas de verdad. ¿Se acuerda que anteriormente hablábamos de los sondeos? Bueno pues en esas muestras está el polen que buscamos, pero aún es necesario encontrarlo en la muestra misma. Pensemos que el palinologo esta tratando de encontrar polen entre muchos sedimentos, minerales y material orgánico en descomposición. Podríamos hablar entonces de que en cierto sentido nuestro amigo palinologo esta jugando a una especie de escondida, sólo que para pillar el polen, el palinologo tratara de limpiar la muestra lo mejor posible atacándola con ácidos cuando corresponda.

Para realizar esto en el laboratorio de palinología de los Ángeles se sigue un protocolo de trabajo, es decir una serie de pasos. Por si se pregunta de dónde sale este protocolo el profesor aclara que es “un protocolo modificado del protocolo estándar de trabajo en palinología que fue originalmente presentado a la comunidad científica por los años 50 por un sueco el profesor Hertzman, y de ahí en adelante estuvieron otros suecos que también trabajaron mucho en la parte metodólogica que son Faegri y Iversen”


Iniciamos la búsqueda de los antiguos granos. El primer paso consiste en extraer una muestra del tramo que se va a analizar. Ésta se pone en una cápsula petri y es pesada. Es importante señalar que todo lo que ocurra con la muestra y todos los datos que ésta dé, serán anotados en un cuaderno; de esta forma ninguna parte del proceso se perderá. Luego de haber pesado la muestra, ésta se pone a secar en un horno y una vez deshidratada vuelve a ser pesada para que el resultado sea anotado en el cuaderno. Lo anterior se conoce como peso seco, y señala el profesor Rondanelli “es el peso efectivo que se usara luego para cálculos estadísticos”. Tanto el tiempo como la temperatura a las que se someterá la cápsula dependerá del tipo de suelo y el grado de humedad.


El siguiente paso para limpiar la muestra es el tratamiento con acido clorhídrico al 10%. ¿Para qué se preguntaran ustedes? Lo mismo me preguntaba yo. Pues bueno, este tratamiento sirve para limpiar la muestra de los carbonatos presentes en ella. Los carbonatos son un tipo de minerales presentes en la tierra, un tipo de carbonato es la tiza por ejemplo. Una vez terminado este proceso el técnico agrega agua destilada para lavar la muestra.


Además es en esta parte del proceso cuando se agrega un testigo falso, es decir una pastillita que contiene polen, de esta forma se podrá confirmar si el proceso esta bien hecho y no se perdió el material polínico de la muestra en el transcurso de esté. En otras palabras, si al final del proceso la muestra da como resultado cero presencia de granos de polen, quiere decir que el proceso estuvo mal hecho y se destruyó el material que había.

Cada vez se va limpiando más y más la muestra para poder aproximarse lo más que se pueda, a lo que el Dr. Rondanelli denomina como una muestra limpia. Para esto viene el tercer paso que es el tratamiento de hidróxido de potasio al 10%. Este tratamiento se realiza en lo que se conoce como a "baño térmico durante 10 minutos". Con esto se consigue separar las arcillas de la muestras y eliminar los ácidos húmicos que son moléculas que se encuentran en la tierra y surgen producto de la descomposición de materia orgánica. Luego de esto se toman las muestras y se traspasa a un tubo para centrifugar, se agrega agua destilada para luego llevarlo a la centrifuga que hará girar el tubo en su interior alrededor de un eje, de esta forma el contenido más pesado de la muestra se acumulara en la base y lo más liviano como el agua destilada con el químico utilizado quedará arriba, luego esto se bota y se repite el proceso para lavar la muestra. Así se limpia la muestra para poder continuar con el siguiente paso, el tratamiento con acido fluorhídrico.

El tratamiento con acido fluorhídrico puro es el siguiente en esta busqueda. Este tratamiento se realiza para poder limpiar las muestras de sílices. El sílice es uno de los componentes de la arena, también aparece en forma de cuarzo generalmente. Lo que hace la técnica del laboratorio, es dejar la muestra en acido fluorhídrico durante 12 horas bajo una campana, sí, como las que se tienen en la cocina. Luego se lava igual que antes, sin embargo ante usar el agua destilada en el lavado, se usa ácido clorhídrico al 10% y caliente, luego de lavar de esta forma se vuelve a lavar la muestra pero ahora si con agua destilada.

Existe un paso que no siempre se usa, de hecho se utiliza “cuando uno desea separar por densidad cuando tiene poco material polínico” explica el profesor. Esté es el tratamiento con cloruro de zinc. Si se utiliza este paso luego debe volver a aplicarse el paso anterior.

Ahora viene el tratamiento con la mezcla acetolítica. La mezcla se hace usando 9 partes de anhídrido acético puro y una parte de acido sulfúrico concentrado. Una vez puesta la mezcla en la muestra, se deja en baño térmico a 100 grados Celsius durante 5 minutos. Todo esto se hace para eliminar el material celulósico. Luego se lava la muestra con ácido acético glacial puro. Todos los residuos que queden se lavan con agua destilada y luego se cambian a otros recipientes y se dejan las muestras suspendidas en glicerina. Mientras se me explica en que consiste esta parte del proceso, a modo de “talla” el profesor me informa que es una muestra muy hedionda, experiencia que tuve el “gusto” de vivir cuando acompañe a la técnica mientras realizaba este paso.

Es en este momento cuando el profesor me explica que aplicar cada uno de estos pasos depende del criterio del palinologo y su experticia. No es recomendable aplicar acetolicis a muestras marinas, por ejemplo, ya que ésta destruye otros buenos indicadores ambientales. Es por esto que es importante no repetir como máquina estos procesos sino entender qué se quiere obtener y qué criterio usar para aplicarlo. La experiencia en esta ciencia es fundamental.

Ya estamos llegando al final de este viaje en la búsqueda del grano de polen. Lo único que falta para llegar al microscopio es el filtrado y montaje de la muestra. El filtrado es un proceso físico que consiste en hacer pasar la muestra por unas mallas de entre 150 micrones y 10 micrones. Una vez filtrada la muestra pasamos al montaje, para lo que se monta en un portaobjeto la muestra con gelatina Kisser, esta es una gelatina especial. Una vez que se tiene la muestra en la gelatina, se cubre el portaobjeto y se sella con parafina.

Y con esto termina este juego de las escondidas, si el trabajo está bien hecho el palinologo contará con una muestra limpia que facilitará su trabajo a la hora de contar los granos. Además en este momento se termina el proceso químico-físico y pasamos a la parte de la interpretación de estos datos.

Imagenes en Orden decendente:

- 1: Tecnico del laboratorio de palinología del campus los Ángeles de la Universidad de Concepción
- 2: Pastillas de polen. Testigos Falsos.
- 3: Maquina centrifugadora.
- 4: Recipientes para el filtrado.
- 5 y 6: Muestras montadas en la gelatina Kisser.